Real-time Quantitative PCR (qPCR / RT-qPCR)
biologia molecular / quantificação de ácidos nucleicos
Técnica de amplificação e quantificação simultânea de sequências específicas de DNA ou cDNA (complementar ao RNA), que monitora em tempo real o acúmulo de produto de PCR por meio de fluorescência emitida por corantes intercalantes (SYBR Green) ou sondas de hidrólise (TaqMan). A quantificação é baseada no ciclo no qual a fluorescência ultrapassa o limiar de detecção (Ct, cycle threshold), proporcional à quantidade inicial de molde. Permite quantificação absoluta (com curva padrão) ou relativa (normalização por genes de referência) de expressão gênica, número de cópias de DNA ou carga viral. Método de referência para validação de dados de RNA-seq, detecção de variações do número de cópias (CNVs) e diagnóstico de doenças infecciosas.
qPCR é utilizada para monitoramento da carga viral de SARS-CoV-2 em amostras de swab nasofaríngeo durante a pandemia de COVID-19, com detecção de genes virais específicos.
RT-PCR (transcrição reversa) · PCR digital (dPCR) · Sonda molecular (probe) · RNA-seq
Fonte: NHGRI – National Human Genome Research Institute. Conteúdo educativo, não é recomendação médica individual.
