Digital PCR (dPCR / ddPCR)
biologia molecular / quantificação absoluta de ácidos nucleicos
Método de amplificação e quantificação absoluta de sequências de DNA ou cDNA que particiona a amostra em milhares a milhões de microcompartimentos individuais (gotículas em emulsão ou microcâmaras), nos quais a PCR ocorre de forma independente. Ao final, cada compartimento é classificado como positivo (contendo pelo menos uma molécula-alvo amplificada) ou negativo, e a concentração inicial de molde é calculada por análise estatística de Poisson. Diferente da qPCR, não depende de ciclos de amplificação (Ct) e oferece quantificação absoluta sem necessidade de curva padrão, com maior precisão, sensibilidade e resistência a inibidores. Aplicações clínicas incluem detecção de variantes raras em tumores (biópsia líquida), análise de CNVs e validação de edição genômica.
PCR digital em gotas (ddPCR) é utilizada para quantificar com alta precisão mutações raras de EGFR T790M em DNA tumoral circulante de pacientes com câncer de pulmão tratados com inibidores de tirosina quinase.
PCR quantitativa em tempo real (qPCR) · DNA tumoral circulante (ctDNA) · Biópsia líquida · Sonda molecular (probe)
Fonte: NHGRI – National Human Genome Research Institute. Conteúdo educativo, não é recomendação médica individual.
